湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復(fù)制期間的EdU，借助熒光檢測工具即可準(zhǔn)確地檢測出新增殖的細(xì)胞，快速統(tǒng)計處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測，尤其適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢如何？湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔500μl的Click反應(yīng)液）、96孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔50μl的Click反應(yīng)液）、每管細(xì)胞數(shù)量為10-100萬的流式細(xì)胞儀檢測（每管500μl的Click反應(yīng)液）以及冰凍或石蠟切片的檢測（每個樣品100-200μl的Click反應(yīng)液），不同規(guī)格的本產(chǎn)品可以提供的反應(yīng)的量詳見說明書中的表。光譜特性：488-Azide：綠色熒光，Ex/Em=491/518nm；Hoechst 33342：藍(lán)色熒光，Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。河南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用？上海東寰告訴您。

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒BeyoClick? EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒(DAB法)(BeyoClick? EdU Cell Proliferation Kit with DAB)，是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)的摻入，并通過隨后的點擊反應(yīng)(Click reaction)使EdU被生物素(Biotin)所標(biāo)記，然后加入的辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結(jié)合，再然后通過DAB顯色，從而實現(xiàn)簡單、快速、高靈敏地檢測細(xì)胞增殖的試劑盒。

上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法，但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞，影響了其他染料的結(jié)合染色，導(dǎo)致染色彌散，準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點：安全—–不使用[3H]thymidine，無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法，簡單高效，需三步：EdU孵育；細(xì)胞固定；熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。

與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。上海哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

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